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重組蛋白A瓊脂糖凝膠FF能一次純化多少血清 IgG，提取蛋白Western內(nèi)參如何選擇？

時間：2020-06-26 19:59 點(diǎn)擊次數(shù)：更多 蛋白提取純化 文章

重組蛋白A瓊脂糖凝膠FF能一次純化多少血清 IgG

重組蛋白A瓊脂糖凝膠 FF 能一次純化大量血清 IgG 嗎？如用環(huán)氧活化的瓊脂糖凝膠純化血清 IgG，先要偶聯(lián)其相應(yīng)配基如抗體或蛋白 A 是嗎？這里瓊脂糖凝膠用環(huán)氧活化的意義是什么？
幾十毫升如果一次純化也就用幾十毫升的重組蛋白 A 瓊脂糖凝膠 FF 就可以,也可以分兩三次純化,這都沒有問題,如果是你想做血清中的抗體純化也可以把抗原偶聯(lián)到環(huán)氧活化瓊脂糖凝膠上, 這樣得到的抗體更純, 一般不選擇蛋白 A, 環(huán)氧活化便宜,而且相成的鍵很穩(wěn)定,沒有非特異吸附,是個不錯的方法.

提取蛋白Western內(nèi)參如何選擇

適用范圍	內(nèi)參名稱	分子量大小	注意事項(xiàng)
胞漿蛋白和總蛋白	beta-actin	43kDa	不適用于骨骼肌樣品，細(xì)胞生長條件的改變和細(xì)胞外基質(zhì)成分的相互作用可能會改變肌動蛋白的合成
胞漿蛋白和總蛋白	GAPDH	30-40 kDa	一些生理因素例如缺氧癥和糖尿病會增強(qiáng) GAPDH在特定細(xì)胞中的表達(dá)
胞漿蛋白和總蛋白	Tubulin 微管蛋白	55 kDa	微管蛋白的表達(dá)隨著抗菌和抗有絲分裂抗性藥物而改變
核蛋白	TBP(TATA box binding protein）	38 kDa	不適用于除去DNA的樣本
核蛋白	lamin A	74kDa
核蛋白	Lamin B核纖維蛋白	72kDa	不適用于除去核膜的樣本
核蛋白	Histon H3
膜蛋白	α-Tubulin	55 kDa
膜蛋白	Na-K ATPase
植物內(nèi)參	Rubisco核酮糖二磷酸羧化酶
	Lhcb4多抗